دفاعیه دکتری در دانشکده مهندسی شیمی

سید محمدرضا کاشفی مفرد(دانشجوی دوره دکتری مهندسی شیمی)، یازدهم بهمن ماه 1394 از رساله دکتری خود با عنوان «استفاده از مولکول نگاری در بازشناسی پروتئین های لیزوزیم وآلفا-لاکتالبومین» دفاع می کند.
چکیده این رساله که راهنمایی آن را دکتر فرشته نعیم پور و دکتر پریسا حجازی بر عهده دارند، به شرح زیر است. ضمنا این جلسه دفاعیه ساعت 8 صبح در کلاس 130 دانشکده مهندسی شیمی برگزار می شود.
چکیده
یکی از روش های ساخت سامانه های شناساگر با عملکرد گزینشی، مولکول نگاری میباشد که امکان جذب و بازشناسی اختصاصی مولکولی را با قالب گیری پلیمری از آن فراهم می کند. در این تحقیق، پلیمرهای منقوش هیدروژلی و کرایوژلی برای جذب و بازشناسی پروتئین های لیزوزیم و آلفا-لاکتالبومین ایجاد گردید. ابتدا، هیدروژل منقوش با لیزوزیم توسط مونومر عاملی آب گریز ترسیوبوتیل آکریل آمید در کنار مونومر آکریل آمید و مونومرهای عاملی الکترواستاتیک آکریلیک اسید و دی متیلآمینو اتیل متاکریلات تهیه شد که ظرفیت جذب لیزوزیم و ضریب مولکول نگاری در آن (mg/g 32 و 68/1) بیشتر از نمونه فاقد مونومر آب گریز (mg/g 22 و 09/1) بود. مدلهای ایزوترم جذب آنها نیز تطابق خوبی با داده های تجربی نشان داد. همچنین جذب لاکتالبومین به سبب وجود تعداد اسیدهای آمینه آب گریز سطحی مشابه با لیزوزیم، نزدیک به بازجذب لیزوزیم بود و نشان داده شد که در این حالت می توان از لیزوزیم به عنوان مولکول الگوی مجازی استفاده نمود. در ادامه برای رسیدن به مقدار مونومرهای بهینه در فرمولاسیون مولکول نگاری، ایجاد کمپلکس بین مونومرهای عاملی متاکریلیک اسید و DMA با لیزوزیم مورد بررسی قرار گرفت که نسبت های آنها به لیزوزیم به ترتیب حدود 400 و 100 به دست آمد و همچنین تاثیر نسبت مونومرهای آزاد به کل مونومرها بر روی ایجاد مکان های غیراختصاصی، بررسی شد. سپس کرایوژل منقوش با لیزوزیم با مونومر عاملی AAm و به صورت ستون استخراج فاز جامد تهیه گردید که بازجذب لیزوزیم توسط آن mg/g 6/11 بود. این مطالعات، مبنای فرمولی مناسب برای سنتز کرایوژل منقوش با بکارگیری مونومرهای عاملی الکترواستاتیک شد. برای کرایوژل اخیر، ضریب مولکول نگاری 2/4 و ضریب گزینشگری 24/7 نسبت به پروتئین سیتوکروم حاصل گردید که بسیار قابل توجه بودند. از دیگر موارد بررسی شده، ایزوترم های جذب کرایوژل های منقوش و غیرمنقوش و منحنی های رخنه و اسکچارد آنها بود. طبق مدل لانگمویر، بیشینه ظرفیت جذب لیزوزیم در کرایوژل های منقوش و غیرمنقوش، به ترتیب mg/g211 و 151 بدست آمد. همچنین، آزمون استفاده مجدد انجام و تغییر زیادی در میزان جذب مشاهده نگردید. تصاویر میکروسکوپ SEM و آنالیز طیف سنجی FTIR نیز، ساختار متخلخل ماکرو و حضور EFMs را در پلیمرها تایید کرد.
واژههای کلیدی: مولکول نگاری، مونومرهای عاملی باردار و آب گریز، لیزوزیم، لاکتالبومین، هیدروژل، کرایوژل |